如何有效減少細(xì)胞計(jì)數(shù)板的誤差？

　　細(xì)胞計(jì)數(shù)板的血細(xì)胞計(jì)數(shù)誤差分別來源于技術(shù)誤差和固有誤差。其中由于操作人員采血不順利，器材處理、使用不當(dāng)，稀釋不準(zhǔn)確，細(xì)胞識別錯(cuò)誤等因素所造成的誤差屬技術(shù)誤差；而由于儀器(計(jì)數(shù)板、蓋片、吸管等)不夠準(zhǔn)確與精密帶來的誤差稱儀器誤差，由于細(xì)胞分布不均勻等因素帶來的細(xì)胞計(jì)數(shù)誤差屬于分布誤差或計(jì)數(shù)域誤差。儀器誤差和分布誤差統(tǒng)稱為固有誤差或系統(tǒng)誤差。技術(shù)誤差和儀器誤差可通過規(guī)范操作、提高熟練程度和校正儀器而避免或糾正，但細(xì)胞分布誤差卻難于*消除。因此，搞好紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的質(zhì)量控制一般需采用以下措施。1.避免技術(shù)誤差，糾正儀器誤差
 
　　(1)所用器材均應(yīng)清潔干燥，計(jì)數(shù)板、血蓋片、微量吸管及刻度吸管的規(guī)格應(yīng)符合要求或經(jīng)過校正。①計(jì)數(shù)板的鑒定：要求計(jì)數(shù)室的臺面光滑、透明，劃線清晰，計(jì)數(shù)室劃線面積準(zhǔn)確。必要時(shí)采用嚴(yán)格校正的目鏡測微計(jì)測量計(jì)數(shù)室的邊長與底面積，用微米千分尺測量計(jì)數(shù)室的深度。美國國家標(biāo)準(zhǔn)局(NBS)規(guī)定每個(gè)大方格邊長的誤差應(yīng)小于1%，即1±0.01mm，深度誤差應(yīng)小于2%，即0.1±0.002mm。若超過上述標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)棄之不用。②血蓋片應(yīng)具有一定的重量，平整、光滑、無裂痕，厚薄均勻一致，可使用卡尺多點(diǎn)測量(至少在9個(gè)點(diǎn))，不均勻度在0.002mm之內(nèi)。必要時(shí)采用平面平行儀進(jìn)行測量與評價(jià)，要求呈現(xiàn)密集平行的直線干涉條紋。較簡單的評價(jià)方法是將潔凈的蓋片緊貼于干燥的平面玻璃上，若能吸附一定的時(shí)間不脫落，落下時(shí)呈弧線形旋轉(zhuǎn)，表示蓋片平整、厚薄均勻。同時(shí)，合格的蓋片放置在計(jì)數(shù)室表面后，與支持柱緊密接觸的部位可見到彩虹。精選出的蓋片與其他蓋片緊密重合后，在掠射光線下觀察，如見到完整平行的彩虹條紋表示另一枚蓋片質(zhì)量也符合要求。③目前臨床實(shí)驗(yàn)室多采用一次性微量采血管采集毛細(xì)血管血，除注意定點(diǎn)購買使用信譽(yù)較好廠家的產(chǎn)品外，還應(yīng)對每一批量的采血管進(jìn)行抽樣檢查，可通過水銀稱重法或有色溶液比色法進(jìn)行校正，誤差不應(yīng)超過±1%。
 
　　(2)紅細(xì)胞稀釋液應(yīng)等滲、新鮮、無雜質(zhì)微粒。
 
　　(3)嚴(yán)格操作，從消毒、采血、稀釋、充池到計(jì)數(shù)都應(yīng)規(guī)范，尤其應(yīng)注意的是血樣稀釋及充池時(shí)既要作到充分混勻，又要防止劇烈震蕩為破壞紅細(xì)胞。必須一次性充滿計(jì)數(shù)室，防止產(chǎn)生氣泡，充入細(xì)胞懸液的量以不超過計(jì)數(shù)室臺面與血蓋片之間的矩形邊緣為宜。